2型腺相关病毒重组绿色荧光蛋白对培养神经干细胞转染效率的研究-神经解剖学杂志

2型腺相关病毒重组绿色荧光蛋白对培养神经干细胞转染效率的研究

单位：东南大学医学院,人体解剖与组织胚胎学系,南京,210009

分类号：R3

出版年·卷·期（页码）：2006·22·第五期（1-1）

摘要：

为探讨2型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 2,rAAV-2)载体能否有效地转染神经干细胞(neural stemcell,NSC),本研究采用含有增强型绿色荧光蛋白(enhanced greenfluorescent protein,EGFP)报告基因的rAAV-2(rAAV-2/EGFP);以感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别为1×104、1×105、1×106转染体外培养大鼠胎鼠神经干细胞,在荧光显微镜下观察EGFP的表达.同时,检测子代细胞的活力、增殖倍数、分化情况,以评估rAAV-2对NSC存活、增殖、分化能力的影响.并利用流式细胞仪检测rAAV-2/EGFP对NSC的转染效率.结果显示,转染10 d后各转染组可观察到NSC克隆球发出绿色荧光,起始荧光强度不一,同时荧光强度随时间的延长而逐渐增强.转染21 d后荧光强度达高峰并维持在高水平.流式细胞仪检测结果表明:MOI为1 ×104、1×105、1×106时转染率分别为26 34%、50.97%、56.36%,荧光指数(FI)分别为4.01、12.70、14.08.转染组和未转染组细胞培养7、14、21 d时其细胞活力、增殖倍数、分化均无统计学差异.本实验初步证明rAAV-2能有效地转染NSC.

参考文献：

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