成年小鼠神经干细胞体外培养、鉴定及分化-神经解剖学杂志

成年小鼠神经干细胞体外培养、鉴定及分化

作者：包金风[1] 王虹[1] 吴凡[2] 宋玫香[1] 张晓文[3] 王小琦[3]

单位：徐州医学院,药学院药理教研室徐州医学院,临床医学系07级2班,徐州221004徐州医学院,甘肃省医学科学研究院药理室,兰州,730050

分类号：R329

出版年·卷·期（页码）：2011·27·第二期（1-1）

摘要：

目的:建立一种简便易行的从成年小鼠脑组织分离、培养和鉴定神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的方法,为相关研究提供新的研究手段.方法:采用机械分离和酶消化结合方法分离成年昆明种小鼠的脑组织,用无血清培养基悬浮培养;倒置相差显微镜观察细胞形态;MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)观察NSCs的自我增殖能力;免疫荧光细胞化学技术检测NSCs标志物巢蛋白(Nestin)的表达;多聚赖氨酸铺板和撤除培养基中FGF和EGF的条件下,给予5%血清和1 μm维甲酸诱导NSCs分化,免疫荧光细胞化学技术检测GFAP(标记胶质细胞),β-tubulin Ⅲ(标记神经元)蛋白的表达来测定NSCs的分化能力.结果:从成年小鼠脑组织分离的细胞,在无血清培养液中可形成神经球,并可在体外扩增和连续传代,免疫荧光细胞化学表明神经球Nestin阳性表达,在给予血清和维甲酸条件下神经球可表达GFAP和β-tubulin Ⅲ.结论:本研究成功建立了体外培养成年小鼠脑组织分离和培养NSCs的方法,培养的NSCs具有自我更新、增殖及多向分化潜能.此方法是一个稳定、简便易行的方法,可广泛用于神经干细胞相关的基础和应用研究.

参考文献：

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