携带小鼠IGF-1基因的慢病毒载体构建及其在神经干细胞中的表达-神经解剖学杂志

携带小鼠IGF-1基因的慢病毒载体构建及其在神经干细胞中的表达

作者：朱裕华[1] 彭长凌[1] 陈仁金[1] 袁红花[2] 陈翀[3] 朱孝荣[1]

单位：徐州医学院实验动物中心,徐州,221002徐州医学院神经生物学教研室,徐州,221002徐州医学院血液科实验室,徐州,221002

分类号：R322.8-33

出版年·卷·期（页码）：2012·28·第五期（1-1）

摘要：

目的:构建含有小鼠胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因的慢病毒载体,鉴定其在神经干细胞(NSCs)中的表达.方法:采用RT-PCR方法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增IGF-1基因,克隆入pcDNA3.1质粒,构建慢病毒载体pXZ9-1GF-1.用脂质体介导三质粒共转染法转染293FT细胞,获得病毒上清.分离培养神经干细胞,Nestin免疫荧光化学鉴定.慢病毒感染神经干细胞,显微镜下观察GFP表达情况,通过RT-PCR及ELISA试剂盒分别从mRNA和蛋白水平检测IGF-1的表达.结果:通过RT-PCR法从小鼠的骨骼肌细胞中扩增出IGF-1基因并克隆入pcDNA3.1载体,经亚克隆成功构建慢病毒质粒pXZ9-IGF-1.质粒经脂质体转染293FT细胞获高滴度慢病毒颗粒,体外高效感染神经干细胞.神经干细胞经感染后,IGF-1基因mRNA和培养基中蛋白水平均高表达.结论:成功构建含小鼠IGF-1基因的慢病毒载体pXZ9- IGF-1,并在神经干细胞内获得表达.

参考文献：

服务与反馈：

【文章下载】【发表评论】【查看评论】【加入收藏】

提示：您还未登录，请登录！点此登录