摘要:
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目的:于大鼠海马原代培养的细胞模型中明确星形胶质细胞(Astrocytes,AS)在β-淀粉样蛋白(Amyloid-β,Aβ)诱导的神经元凋亡中是否发挥作用,以及其发挥作用的主要方式.方法:建立4天龄Wistar大鼠海马原代混合培养体系(MIX-S)、纯化原代AS培养体系(AS-S)及纯化原代神经元培养体系(NE-S),用Aβ处理三种不同体系细胞,24 h后收集三种培养液(MNE-Aβ24 h、MAS-Aβ24h、MMIX-Aβ24h)及control组三种培养液(MNE-cntrol、MAS-control、MMix-control).在下一批NE-S和MIX-S培养细胞中,分别用不同培养液或Aβ处理24 h后应用TUNEL法检测细胞凋亡数量的变化.结果:Aβ处理后NE-S凋亡比例显著高于MIX-S,其中MIX-S凋亡与control组相近,MIX-S表现出较弱的Aβ毒性易感性.比较Aβ处理24 h后收集的培养液(MAβ24 h,Aβ前处理)与对照组培养液(Mcontrol)再加Aβ处理(Aβ后处理)培养细胞,发现Aβ前处理(MNE-Aβ24h、MAS-Aβ24h)比Aβ后处理(MNE-control、MAS-control再加Aβ)诱导NE-S凋亡的效果更加显著.而Aβ前、后处理对MIX-S组神经元诱导凋亡的效果类似,接近Control组凋亡比例.结论:AS参与保护Aβ诱导的海马神经元凋亡,其保护作用依赖于AS与神经元构建的MIX-S完整性而并不是由AS分泌入培养液的成分介导.单纯AS-S在Aβ刺激下不仅失去保护功能,且释放促凋亡物质. |
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