针对B7-H1的siRNA对脑胶质瘤U87细胞增殖和凋亡的影响-神经解剖学杂志

针对B7-H1的siRNA对脑胶质瘤U87细胞增殖和凋亡的影响

作者：王曦[1] 皇甫罗锴[1] 杨帆[1] 史圣甲[2] 郭张燕[2] 杨安钢[2] 温伟红[2] 张剑宁[3]

单位：第四军医大学西京医院神经外科,西安,710032第四军医大学西京医院基础部免疫教研室,西安,710032海军总医院神经外科,北京,100037

分类号：

出版年·卷·期（页码）：2013·29·第二期（1-1）

摘要：

目的:利用针对B7-H1的siRNA在脑胶质瘤U87细胞中下调B7-H1的表达,研究B7-H1的表达下调对U87细胞增殖和凋亡的影响.方法:根据人B7-H1的mRNA序列设计并合成两对针对B7-H1的siRNA,于转染前一天将U87细胞接种于10 cm细胞培养皿中,以转染时细胞融合度为50％-80％为宜,分别用250 μ10PTI-MEM稀释15μl siRNA与15μl转染试剂Lipofectamine 2000,将两者混匀室温静置20 rin后,滴入细胞培养皿中.转染60或72 h后利用流式细胞术检测B7-H1在细胞表面的表达情况,利用荧光定量PCR和Western Blot分别检测B7-H1的mRNA和蛋白质水平,并用MTT和流式细胞术检测B7-H1表达下调后,U87细胞增殖和凋亡的改变.结果:与阴性对照组相比,两对针对B7-H1的siRNA均可有效下调U87细胞中B7-H1的表达,流式细胞术结果显示与阴性对照组相比,B7-H1阳性表达率由53.2％分别下调至26.7％和20.6％；MTT结果显示B7-H1表达下调后U87细胞的增殖被显著抑制,培养第5天吸光度值由0.58±0.02分别下降至0.451 ±0.02及0.342±0.016；流式细胞术结果显示B7-H1表达下调后U87细胞凋亡明显,早期凋亡率由0.1％分别增加至12.8％及13.2％.结论:B7-H1的表达下调可有效抑制脑胶质瘤U87细胞的增殖,并促进细胞凋亡,提示B7-H1可能作为脑胶质瘤基因治疗的一个潜在靶点.

参考文献：

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