| 目的:研究NADPH氧化酶4(Nox4)在骨癌痛(CIBP)大鼠背根神经节(DRG)中的表达。方法:48只成年雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham)、骨癌痛组(CIBP)、空病毒对照组(Lenti-NC)与Nox4基因沉默组(Lenti-shNox4)。通过鞘内注射方法给予大鼠重组慢病毒处理,通过胫骨骨髓腔接种Walker256细胞的方法建立大鼠骨癌痛模型,通过胫骨HE染色及行为学检测鉴定大鼠CIBP模型,应用real time RT-PCR检测大鼠DRG中Nox4 mRNA的表达,利用Western Blot和免疫组织荧光染色检测Nox4蛋白在大鼠DRG中的表达和细胞定位,利用商品化试剂盒检测大鼠DRG中H2O2的含量,应用real time RT-PCR和Western Blot检测Nox4基因沉默对大鼠DRG中神经型一氧化氮合酶(n NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)及N-甲基-D-天冬氨酸受体2D(NMDAR2D)和γ-氨基丁酸A型γ2受体(GABAA-γ2)表达的影响。结果:大鼠接种Walker256细胞可造成胫骨破坏及肿瘤细胞生长,PWT减少和TWL缩短;在骨癌痛大鼠DRG中,Nox4的表达显著升高;免疫组织荧光染色结果表明Nox4主要表达于DRG小胶质细胞中;敲减DRG中Nox4表达能减轻骨癌痛大鼠的机械痛敏和热痛敏,降低DRG中H2O2的水平,下调nNOS和NMDAR2D表达,上调SOD和GABAA-γ2表达。结论:敲减DRG中Nox4表达可通过减轻氧化应激反应缓解大鼠骨癌痛。 |
