| 目的:比较研究两种人胚胎干细胞系H8和H9在维持培养、向神经前体细胞和神经元方向分化的特性。方法:采用mTeSR1做为基本培养基，Matrigel做为基质胶，进行无滋养层的维持培养。采用白细胞抑制因子1(Smad-1)双抑制剂的神经前体细胞诱导，和含B27的Neurobasal联合脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的神经元诱导方案。采用免疫荧光化学染色检测胚胎干细胞标记蛋白(Nanog和OCT4)、神经前体细胞标记蛋白(Nestin、Sox2和Pax6)、神经元标记蛋白Tuj-1的表达。结果:在维持培养和神经诱导的早期：H8和H9细胞在胚胎干细胞标记蛋白表达及类胚体形成方面无显著差异。神经前体细胞阶段：诱导分化相同时间(诱导14 d),两种细胞系的玫瑰花环样结构形成，及巢蛋白(Nestin)、SRY转录因子2(Sox2)的表达均无显著差异；相对而言，更高比例的H9细胞表达神经前体细胞标记蛋白成对同源基因盒6 (Pax6)。神经元阶段：诱导相同时间(诱导30 d),约89%的H9细胞表达神经元标记蛋白Tuj-1,而仅约34%的H8细胞表达Tuj-1。结论:H8、H9细胞的胚胎干细胞特性相似。与H8相比，H9细胞的神经元方向分化效率更高，更适合进行神经系统疾病机制及转化研究。 |
