目的:观察蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号分子在小鼠胚胎发育晚期和生后早期海马中的表达变化。方法:在E18、P1、P7、P14、P21和P28时间点取昆明小鼠海马组织,利用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察海马细胞数量;利用免疫组织化学和Western Blot检测各时间点海马中AKT和mTOR蛋白的表达变化。结果:DAPI染色显示,E18~P21,海马齿状回(DG)颗粒细胞层和阿蒙角(CA)锥体细胞层细胞先逐渐增多,P7最多,之后逐渐减少(P<0.01);P28与P21相比,细胞数量无显著性差异(P>0.05)。免疫组织化学技术显示,E18~P7,海马DG和CA的AKT和mTOR阳性细胞逐渐密集,光密度逐渐增大;P7阳性细胞最密集,光密度最大;P14~P21,阳性细胞逐渐稀疏,光密度减小(P<0.05)。P28与P21相比,DG的AKT阳性细胞更稀疏,光密度减小(P<0.05),CA的AKT阳性细胞、DG和CA的mTOR阳性细胞的密集程度无明显改变,光密度无显著性差异(P>0.05)。Western Blot结果显示:E18~P21,AKT和mTOR的表达均表现为先逐渐增高,P7达高峰,之后逐渐降低(P<0.01);P28与P21相比,AKT表达无显著性差异(P>0.05),mTOR表达减少(P<0.01)。结论:AKT和mTOR蛋白在小鼠胚胎发育晚期和生后早期的海马中呈高表达。AKT/mTOR信号通路可能与海马发育密切相关。 |